灭菌方法

一、物理灭菌

分类

含义

适用范围

干热灭菌法

火焰灭菌法

系指将灭菌物品直接用火焰烧灼达到灭菌的方法

适于手术刀、镊子等，一般仅用于瓷器、金属或搪瓷的器具或器皿

干热空气灭菌法

系指利用高温干热空气达到灭菌的方法。繁殖性细菌一般需℃以上干热1小时即可被杀灭；耐热性细菌需℃～℃维持2小时以上

本法适用于玻璃器皿、搪瓷容器及油性和惰性辅料，如液体石蜡、油类、脂肪类、滑石粉、活性炭等

湿热灭菌法

利用饱和水蒸气或者是沸水来进行杀灭菌的方法

热压灭菌法

本法系在热压灭菌器内，利用高压饱和水蒸气杀灭微生物的方法。该法是最可靠的灭菌方法，特别适用于输液剂。热压灭菌法所需的温度及与温度相当的压力和时间，常用的热压灭菌器有小型的手提式热压灭菌器、大型的卧式热压灭菌器等

适用于耐热药物及其水溶液、手术器械及用具等物品的灭菌

流通蒸气灭菌法和煮沸灭菌法

系指在常压下用℃的水蒸气或用水煮沸以杀灭微生物的方法。灭菌时间一般为30～60分钟，可杀灭繁殖型细菌，但不一定能完全杀灭芽胞

适于含有抑菌剂药液的灭菌，1～2ml的注射剂及耐热品种的灭菌

低温间歇灭菌法

系指将待灭菌的物品先用60℃～80℃加热1小时以杀死细菌繁殖体，然后再室温或孵箱保温24小时，以使芽孢发育成繁殖体，再进行加热将其杀灭，如此操作三次以上，至全部灭菌的方法

适于必须采用加热灭菌但又不耐高温的药品。应用本法灭菌的制剂，需添加适量的抑菌剂

紫外线灭菌法

紫外灯产生紫外线，通常波长为～nm，～nm的紫外线杀菌力是最强的。紫外线可以使微生物核酸蛋白变性然后死亡，同时空气受到紫外线辐射以后产生微量的臭氧也可以发挥杀菌的作用

仅适用于空气与物品表面的灭菌。紫外线灭菌的适宜温度是在10℃～55℃，相对湿度一般为45％～60％

辐射灭菌法

辐射灭菌一般是应用γ射线杀灭细菌的方法。一般用60Co辐射源放射γ射线来杀菌，被灭菌物品的温度仅有几度的变化，其灭菌的机理是γ射线直接的作用于微生物的蛋白质、核酸与酶等，促使化学键的断裂，杀死微生物；又可以间接的作用于微生物体内的水分子，引起水的电离与激发，生成自由基，再作用于微生物的活性分子，致使微生物死亡。由于γ射线穿透力极强，可用于密封与整箱已包装的药物的灭菌，灭菌的效果可靠，通常认为中成药用10千格瑞（KGY）以下的剂量辐射均能够达到卫生标准的要求

二、滤过除菌法

含义

一般指使药液通过除菌滤器中的适宜的滤材，用物理阻留的方法来滤除活的或者是死的微生物，从而达到除菌目的的方法。通常繁殖型微生物的大小约1μm，芽胞约为0.5μm。通常滤材孔径在0.21μm以下，才可以有效地阻挡微生物以及芽胞的通过

适用范围

不耐热的低黏度的药物溶液，尤其是一些生化制剂。在除菌的过程中，同时除去一些微粒的杂质。本法必须配合无菌操作的技术，成品必须经过无菌检查合格以后方可达到无菌的要求

常用的滤器

微孔滤膜滤器、垂熔玻璃滤器和砂滤棒

三、化学灭菌法

化学灭菌法

一般指用化学的药品来杀灭微生物的方法

同一种化学的药品在低浓度的时候呈现抑菌的作用，而在高浓度时则能够起杀菌作用

能使微生物蛋白质变性死亡，或者是与酶系统结合从而影响代谢，或者是改变膜壁通透性使微生物死亡等

浸泡和表面消毒法

消毒一般是指杀死病原微生物的方法，常用于物体表面的灭菌。但是化学消毒剂大多仅能够杀死微生物的繁殖体而不能够杀死芽胞，能控制一定范围的无菌的状态

应用时可将消毒剂配制成适宜浓度，采用喷淋、涂擦或者是浸泡等的方法对环境、物料、器具等进行消毒。常用的化学消毒剂有新洁尔灭溶液、洁尔灭溶液、甲酚皂溶液、苯酚、75％乙醇等

气体灭菌法

一般指使用能形成气体或者是产生蒸气的化学药品以达到灭菌目的的方法

环氧乙烷的灭菌法

环氧乙烷室温的条件下为气体，其分子作用于菌体以后，能与菌体蛋白、核酸与酶中的-NH2、-COOH、-SH等的基团起反应，而致使菌体死亡。环氧乙烷分子易穿透塑料、纸板或者是固体粉末，因此可用于塑料包装的散剂、原料粉末、颗粒等固体药料以及其他固体器具的灭菌。环氧乙烷因为具有可燃性，与空气混合的时候，当空气的含量达到3.0％（V/V）即可爆炸，应用的时候需用90％二氧化碳来稀释。环氧乙烷对皮肤、眼黏膜均有损害，可产生水疱或者是结膜炎，应用时应该注意防护

蒸气熏蒸灭菌法

采用甲醛、乳酸、臭氧（O3）或者是气态过氧化氢等的化学品，通过加热产生的蒸气进行的空气环境的灭菌方法

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