在发酵过程中如何做杂菌污染控制

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剖析发酵染菌的起源,归纳防备发酵染菌的阅历训导,把发酵染菌覆灭在产生过去,防患于已然,是踊跃礼服发酵产业临盆历程中杂菌的最急迫的举措。

发酵产业中杂菌浑浊的起源

1、染菌的菌型分类和杂菌生计的前提

很多杂菌与咱们的产业菌种有着类似的成长前提,是以能够在产业发酵中很好的成长。咱们要操纵杂菌的浑浊,必需对杂菌的成长前提、代谢路径至极懂得。发酵历程中较易熏染的杂菌紧要有真菌的酵母菌、霉菌等,细菌中的是非杆菌、球菌等以及病毒噬菌体。最适成长温度是指在此温度下,微生物的推陈出新抵达最大的速度,普遍微生物的成长最适温度在25~35℃。懂得各菌种的最适成长温度,对剖析染菌的起源有必然的参考代价。微生物在高出其最高成长温度的处境中成长就会做古,微生物在高温下做古的机理是酶遇热后落空活性激发推陈出新阻碍而引发的。咱们采取致死温度和致死时候为准则。把握种种微生物的致死温度和致死时候有益于灭菌操纵。普遍环境下,大肠杆菌、肺炎双球菌和酵母菌在60℃左右10min便可做古,而枯草芽孢杆菌则要℃时17min做古,嗜热芽孢杆菌则需求℃时12min才力杀死。微生物成长处境中的pH与微生物的行动有亲密相干,pH的变动或许引发某种代谢产品的积存,而pH若产生渐变有或许是由于熏染了某种杂菌。普遍环境下,细菌成长的pH局限为4~9,最适为7或许微碱性。霉菌和酵母菌成长的pH局限为2~7,最适为5或微酸性。懂得种种不同微生物成长的pH局限有益于找出染菌的起源并对发酵前提加以操纵。

2、染菌的起源

由于产业发酵的很多关节都是半怒放式的,许重环境下染菌是不成防备的题目,不过染菌的起源很多,紧要有治理不善引发的人为成分、种子带菌、设置机关不正当、工艺管线安设不正当、设置存在走漏或死角和空气染菌等。

(1)种子带菌。遵循永恒以来的阅历,在发酵的前期,尤为是0~6h内很少染菌,而在10h或20h今后染菌数量会渐渐增加以至会蓦地增加。种子浑浊芽孢菌或许是灭菌不完全形成的,倘若浑浊了酵母菌或霉菌有或许是种子带菌而至。为了弄清杂菌是不是是种子带菌而至,在接种后要将接种瓶中残余的小量种子液赓续举办教育,以考察断定是不是为种子带菌。如遇浑浊菌数少,且所浑浊的杂菌又对教育历程中形成菌所渗出的抗生素敏锐,在这类环境下经过无菌实验很难教育;但在种子罐或许发酵罐中则仍能赓续成长、繁衍,以至会迫害发酵,这类环境该当为种子带菌。

(2)设置成分。发酵临盆历程中设置上存在的空隙也是染菌的一个急迫成分,在设置机关中,构成发酵染菌的成分有如下几方面:设置机关不正当,设置安设不正当,设置自己的走漏、死角和设置治理上的空隙。其余发酵法子计划不正当也简单染菌。设置的空隙或许由化学侵蚀、电化学侵蚀、磨蚀以及操纵不妥引发设置穿孔。发酵的系统设置不正当也会染菌,比方蒸汽系统、无菌空气系统、物料消毒系统、冷水系统等。蒸汽的温度高下、压力巨细、蒸汽中含冷凝水量会影响蒸汽的品质,由于湿饱和蒸汽中冷凝水含量大,蒸汽温度低、压力摇动大,或许形成灭菌温度时候达不到杂菌的致死时候和致死温度而形成发酵染菌。蒸汽管路太长、歧途经量、轮回运用或许贯通未消毒设置城市形成染菌。空气系统形成杂菌的成分紧要有空气中带油带水、总空气系统的安设不妥以及没有按期反省。物料消毒系统引发的杂菌主借使设置的死角积存杂菌或许是没有按期反省。

(3)人为成分。形成染菌的人为成分是指操纵者的操纵法子、操纵品质和操纵者的做事义务心等从来能够防备而没有防备的染菌成分。人为成分包含进罐前未做周密度反省、接种违犯操纵规程、检验品质不够验收轨制、操纵不流利或许过失。人为成分形成的杂菌浑浊必需求引发充沛的关心,由于很多时刻人为形成的染菌每每是操纵人员一些知法犯法、麻痹粗心或许幸运心绪而至,而一旦染菌,庞大的经济损失就会给人们以深痛训导。

发酵产业中操纵杂菌的技能

在懂得了大部份的染菌起源后,咱们该当针对染菌起源对各方面加以改良,把染菌的危急降到最低。防备杂菌浑浊的第一步是要做好进罐前的消毒灭菌做事。

1、发酵产业中的灭菌技能

(1)教育基的灭菌。教育基罕用的灭菌法子有干热灭菌法、湿热灭菌法、射线灭菌法、化学方剂灭菌法、过滤除菌法、火焰灭菌法、臭氧灭菌法等.

现在发酵产业中运用至多的是湿热灭菌法。湿热灭菌操纵高饥寒和蒸汽具备很强的穿透能耐,同时在冷凝时会放出大批冷凝热的性质,而将物料温度抬高,使微生物体内的卵白质凝聚变性,而抵达杀死种种微生物举办灭菌的法子。灭菌前提每每是℃30min。湿热灭菌具备蒸汽根源简单、潜热大、穿透能耐强的特性,与其余灭菌法子比拟具备灭菌结果好、操纵花费低的长处。干热灭菌法是操纵枯燥高温的热空气将微生物体内的卵白质氧化举办灭菌。罕用的干热灭菌的前提为℃下保温1~2h。干热灭菌的长处是可坚持在枯燥形态,不过灭菌结果不如湿热灭菌。

(2)空气的过滤除菌。好氧菌在发酵历程中需不休通入空气,以供给微生物呼吸和代谢所需求的氧气。空气中的微生物大多是细菌和种种胞子,也存在酵母菌和病毒粒子,它们大多附着在空气的尘土上,空气除菌主借使裁撤空气中的微粒。空气除菌的法子紧要有辐射灭菌、化学杀菌、静电除尘和加热灭菌等,但关于大流量空气的除菌现在仍旧遍及采取纤维介质过滤除菌法子。现在做为空气除菌介质的有棉花纤维、超细纤维纸、维尼龙纤维等。空气介质过滤时,介质间的间隙要宏大于粒子的直径。纤维介质阻留粒子机制有几方面:拦截挡留、惯性碰撞扣留和布朗分散疏通。

(3)设置和管道灭菌设置和管道在运用前也必需保证无菌形态。

1种子罐、发酵罐、计量罐、补料罐等空罐的灭菌要从各罐底部的相关通道通入蒸汽,使罐内压力抵达0.MPa(表压),保持45min。灭菌历程应从各罐顶部的俄相关阀门排出空气,并使蒸汽经过,抵达死角灭菌。灭菌了结,合上蒸汽阀后,待罐内压力低于空气过滤器压力时,通入灭菌空气保压至0.MPa(表压)。

2空气总过滤器和分过滤器的灭菌从空气过滤器上部通入蒸汽,并从上、下排气口排气,压力保持在0.MPa(表压),灭菌2h。灭菌了结后通入收缩空气将空气过滤器吹干,而后保压。

3补料罐路、消沫剂管路和接种管路灭菌普遍请求压力为0.3~0.45MPa,保温时候1h。

2、杂菌的操纵技能和提防染菌的举措

(1)杂菌操纵。针对不同的染菌起源,咱们该当选取不同的举措加以操纵。若产生了染菌形势,首先要找到染菌的起源,再选取弥补的举措,假使当批次的产品无奈回旋,也应详细搜索其起源,加以纠正为今后的临盆积存阅历训导。

关于种子带菌的环境,为了防备种子带菌,最急迫的是在制备种子时对沙土管、冷冻管、斜面及摇瓶必需严酷操纵。分外是由液体菌丝体接种时的母瓶是易于导致染菌的关节,是以,坚持摇瓶的干净能够节减被杂菌浑浊的机缘。关于设置走漏的环境,由于弱小的走漏用肉眼很难发掘是以必需求对设置举办按期反省,免得形成大面积染菌。关于仪器设置的材料该当采用耐侵蚀材料、增加缓蚀剂、操纵及改良侵蚀处境等举措,能够下降或防备化学侵蚀。用阴极爱护法能够防备电化学侵蚀设置。

在产业发酵中,由于治理不善形成染菌题目也很严峻。杰出的发酵设置和严酷的灭菌操纵是防备染菌的先决前提。不过,纯真关心技能操纵而无视技能治理,就不能博得使人称心的防菌结果。防备发酵染菌的技能治理是企业技能治理的一个急迫构成部份,它对一个发酵工场的做事人员、厂房、卫生、调整以及设置、原材料和临盆操纵都有必然的请求。分外市对发酵染菌汇报要据实用心填写,以便举办商议、剖析和找出起源,汲取训导。防备再次产生。

在发酵产业中遍及存在着噬菌体迫害,尤为在谷氨酸、酶制剂、抗生素、有机溶剂核干酪、酸乳等临盆中。现在关于噬菌体浑浊所选取的举措还不能使迫害降到零,不过的确能使染菌率大为下降。这些举措紧要有:按期反省噬菌体,懂得其数量的变动和散布;改良处境,坚持临盆区干净;用药物防治和抢救技能;抗噬菌体菌株的选育及其正当运用。

(2)提防染菌举措。在不同的产业临盆中,提防杂菌的举措也不尽不异。要在详细处境中做详细剖析,袭用确切可行的举措节减杂菌的熏染。上海市科学钻研所承当,上海酿造四厂协调对酱油酿造制曲中杂菌浑浊操纵举办了钻研。钻研发掘,在种曲透风制曲临盆中增加适当的冰醋酸对罕见的微球菌、链球菌、双球菌和枯草芽孢杆菌有显然的按捺影响,有用的防备酸曲、坏曲的产生,保险了制曲品质,改良了产品卫生,抬高了酱油澄澈度。如许的提防染菌的思绪是值得鉴戒的。

(3)进展。发酵的杂菌操纵技能是从推行中形成的科学,是归纳抬高到理论,再回到推行中去收拾题目的一门学科。为了覆灭染菌题目,必需从产业临盆早期的根底计划抓起,要夺取做到“发酵设置、产业管线的零染菌率计划”,把染菌的危急操纵到最低,要以提防为主,防患于已然。

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